强力霉素单克隆抗体制备及ciELISA检测方法的建立

摘要：

以人工合成的强力霉素-牛血清白蛋白(DC-BSA)为抗原免疫BALB/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法选择细胞融合的备用小鼠；应用杂交瘤技术建立分泌DCMcAb的杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备DCMcAb,并对DCMcAb的免疫学特性进行鉴定；应用DCMcAb建立检测DC的ciELISA方法,并对其相关特性进行检测.结果表明:筛选后获得1株分泌特异性抗体的细胞3D1-H4,细胞培养上清效价为1∶(8×102),腹水效价为1∶(5.12×105),抗体为IgG1型免疫球蛋白,与四环素、土霉素和金霉素分别有8.87％、5.86％和2.74％的交叉反应率,与其他抑制物无交叉反应性；ciELISA检测方法的线性范围为1.58～199.53ng/mL,灵敏度为2.88 ng/mL,半数抑制的质量浓度IC50为36.31 ng/mL,斑点叉尾(鲴)肌肉和肝脏样品中DC的平均添加回收率分别为85.13％和79.69％,平均批间和批内变异系数均小于15％,不同基质对检测结果影响小.所建立的ciELISA方法可以应用于水产品中DC残留的检测.

关键词：强力霉素(DC)、杂交瘤细胞、单克隆抗体、间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA)、水产品、残留检测

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分类号：S948(水产保护学)

资助基金："十一五"国家科技支撑计划"渔药安全使用及快速检测技术研究"项目2006BAD03B04-04;中央公益性研究院所基本科研业务费专项资金项目2011JBFA19

在线出版日期：2013-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：112-117