10.3969/j.issn.1000-2421.2012.03.006
硫化叶菌超表达载体构建及Mre11的表达
利用araS启动子并在穿梭载体pZC1及pEXA的基础上构建硫化叶菌超表达载体pZC2,成功超表达了带有C端6×His标签序列的DNA双链断裂修复蛋白Mre11,进一步采用共纯化法鉴定到Mre11蛋白的作用配体Rad50,确定上述蛋白在高浓度盐(500 mmol/L NaCl)中仍能形成MR复合体,表明该复合物在逆性条件下可能仍保持DNA断链修复的功能.进一步共纯化分析表明,基因组DNA片段是MR复合体形成的必需条件,在缺乏基因组DNA片段的情况下古菌分子伴侣蛋白结合并可能保护Mre11,该表达系统能够有效地应用于鉴定蛋白质的体内作用网络.
古菌、硫化叶菌、超表达载体、Mre11蛋白、共纯化
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Q936(微生物学)
国家自然科学基金项目31100050,31128011
2012-07-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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293-297