唐鱼热休克蛋白60基因cDNA克隆及表达
采用RT-PCR和RACE技术,成功克隆了唐鱼(Tanichth ys albonubes)热休克蛋白60基因cDNA全长序列,命名为TaHSP60(GenBank登录号:HM234132).研究表明:该基因序列全长为2 486 bp,5′端非翻译区(URT)102 bp,3'URT 656 bp,开放阅读框(ORF)1 728 bp,编码575个氨基酸.序列比对分析表明唐鱼HSP60与斑马鱼(Danio rerio)的相似性高达96.2%,与鲫(Carassius auratus)、褐牙鲆(Paralichth ys olivaceus)、大西洋鲑(Salmo salar)以及非洲爪蟾(Xenopus tropicalis)的相似性分别为93.2%、89.7%、88.3%和83.8%.Clustal X比对结果表明:该序列含有典型的mt-HSP60特征序列、ATP结合位点,以及C末端保守的重复区域GGM.进化分析结果表明,唐鱼HSP60与斑马鱼HSP60聚为一支,二者亲缘关系较近.荧光定量PCR显示唐鱼HSP60的mRNA在肝脏、肌肉、鳃、鳍条、眼睛、卵巢、肠道和脑等8种组织中均有表达,其中肝脏中表达量最高,而在鳃和鳍条呈微量表达.统计分析表明,其他各组织与肝脏相比均有显著差异.铜暴露后,唐鱼肝脏HSP70mRNA表达水平分别在48 h和96 h出现上调,均显著高于对照组.
唐鱼(Tanichth ys albonubes)、热休克蛋白60(HSP60)、克隆、表达、荧光定量PCR
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Q781(基因工程(遗传工程))
国家水体污染控制与治理科技重大专项2008ZX07211-007
2012-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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