苏云金芽胞杆菌质粒p26复制功能区的克隆

摘要：

利用特异引物从基因组BAC文库筛选到1个35 kb的片段,对该片段测序比对分析发现可能含有p26的复制区.为了验证该片段中是否含有p26的复制区,首先,将大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT304用EcoR I酶切切掉苏云金芽胞杆菌复制子后自连,获得复制子克隆载体pHT304E;随后,将12 kbEcoR I片段亚克隆到载体pHT304E上电转化无晶体突变株BMB171,获得具有抗性的转化子,证明该片段具有复制功能.缺失实验证明最小复制功能区包含2个必需的ORF.经过40代无抗培养,最小复制区复制稳定性达到90％以上.

关键词：苏云金芽胞杆菌、质粒、特异引物、细菌人工染色体文库、克隆、复制子、缺失突变

所属期刊栏目：30

分类号：Q754(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金项目3087066

在线出版日期：2012-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：558-562