甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取及双向电泳体系的优化

摘要：

以甘蓝型油菜品种青油10号幼苗期根系为材料,采用三氯乙酸/丙酮沉淀法、酚提法及酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法分别提取甘蓝型油菜根系可溶性蛋白.以牛血清蛋白为标样,使用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及双向电泳(2-DE)检测,所得2-DE凝胶图片经PD Qaest软件分析,分别检测得到644、645、669个蛋白点.对双向电泳条件进行优化,选择改进的酚提法提取蛋白,采用17 cm(pH 5～8)的IPG胶条、蛋白上样量150μg及10%的SDS-PAGE胶含量,可以获得分辨率高、重现性高的2-DE凝胶图片.

关键词：甘蓝型油菜、根系、蛋白质提取、双向电泳

所属期刊栏目：30

分类号：Q945.12;S511(植物学)

资助基金：教育部高校博士点基金项目0090146110006;华中农业大学自主科技创新基金项目2009SC008

在线出版日期：2011-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：219-224