黏质沙雷氏菌诱导的黄喉拟水龟SMART cDNA文库构建及相关基因的鉴定
以致病黏质沙雷氏菌人工感染的黄喉拟水龟肝组织为材料,应用SMART(switching mechanism at5'end of RNA transcript)技术,构建了黄喉拟水龟的全长cDNA文库.首先用SMARTTM PCR cDNA systhesis kit合成全长的双链cDNA,通过琼脂糖凝胶分级分离技术切除小片段的cDNA,将大于500 bp的cDNA连接到pGEM-T载体中,电转化到JM109感受态细胞.在构建好的文库中,经测定,文库约含有1.8×105个重组子,重组效率达90%,插入片段多在0.5~3.0 kb之间.对库中长度约为1 000 bp的80个基因进行了测序,结果显示大部分首次在龟类发现.测序鉴定的基因包括免疫相关基因9个、信号传导基因6个、催化酶类基因8个、糖代谢相关基因2个、转运相关基因1个、结构基因2个.
黄喉拟水龟、黏质沙雷氏菌、SMART全长cDNA文库、基因鉴定
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家重点基础研究发展计划项目2004CB117401;广东省科技兴渔项目B200701A06
2011-05-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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