黑曲霉木聚糖酶基因xynA的克隆及真核表达载体的构建

摘要：

从黑曲霉(Aspergillus niger)GIM3.452中克隆得到木聚糖酶基因xynA的成熟肽编码序列.通过重叠延伸PCR将不带原基因信号肽编码序列的xynA基因片段和猪腮腺分泌蛋白(parotid secretory protein,PSP)基因的信号肽进行拼接得到融合片段SPA,并将其克隆到真核表达载体pcDNA6/HisTM A中,得到重组质粒pcDNA-SPA,重组质粒经过酶切、测序鉴定其读码框的正确性,在脂质体介导下将重组质粒pcDNA-SPA转染猪肾细胞(PK15),通过RT-PCR证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中检测到木聚糖酶活性为7.6 IU/mL.

关键词：黑曲霉、木聚糖酶、xynA基因、真核表达

所属期刊栏目：29

分类号：S813(普通畜牧学)

资助基金：国家"863" 项目2008AA101008;国家重大专项2008ZX08006004、2009ZX08006-012B

在线出版日期：2010-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：588-592