水稻纹枯病菌原生质体制备与再生条件的优化

摘要：

为获得进行水稻纹枯病菌遗传转化所需的高质量原生质体,选用该病菌强致病力菌株GD-118,分别从酶种类、菌龄、酶解时间、酶解温度、酶液pH值和渗透压稳定剂及其浓度6个方面优化了原生质体的制备条件,从酶解时间和渗透压稳定剂及其浓度2个方面优化了原生质体的再生条件.结果表明:优化后的水稻纹枯病菌原生质体制备的最佳条件组合是"纤维素酶+溶菌酶+崩溃酶"组合酶、总酶终质量浓度10 mg/mL、菌丝菌龄15 h、酶解时间3 h、酶解温度35 ℃、酶液pH 5.6、以0.6 mol/L MgSO4·7H2O为渗透压稳定剂,此最佳条件组合所制备的原生质体产率高达4.00×107/g;原生质体最佳的再生条件是酶解3 h的原生质体在含1.0 mol/L甘露醇的再生培养基上26 ℃时进行培养,在此条件下可获得最佳的再生效果,再生率为39%.

关键词：水稻纹枯病菌、原生质体、制备、再生

所属期刊栏目：29

分类号：S435.111.4+2(病虫害及其防治)

资助基金：国家2007年公益性行业农业科研专项nyhyzx3-16,原nyhyzx07-049;教育部留学回国人员科研启动基金项目教外司留[2006] 331号

在线出版日期：2010-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：546-551