乳酸克鲁维酵母乳糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质

摘要：

通过PCR扩增从乳酸克鲁维酵母基因组获得乳糖酶基因lac4,将其克隆至大肠杆菌表达载体pET-28a(+),并在大肠杆菌BL21中获得表达,酶活性达(44.78±2.84) U/mL.利用Ni-Resin HP亲和层析技术纯化该酶,SDS-PAGE分析表明,重组酶分子质量约为122 ku.酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为43℃,37℃时半衰期为30 min,最适反应pH为7.0,在pH 4.0～10.0范围内有良好的稳定性,Ca~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(2+)、Co~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)对酶有非常明显的激活作用,比酶活性为(255.55±2.32) U/mg,酶反应常数Km为3.49 mmol/L,最大反应速率v_(max)为4.22 mmol/(min·mg) .

关键词：乳酸克鲁维酵母、乳糖酶、基因表达、酶学性质

所属期刊栏目：29

分类号：Q939.9(微生物学)

资助基金：浙江省重大科技攻关项目2004C12010

在线出版日期：2010-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：175-180