10.3321/j.issn:1000-2421.2009.05.022
柑橘线粒体DNA高效提取及RAPD分析
以柑橘胚性愈伤组织为试材,采用差速离心结合蔗糖衬垫法建立了柑橘线粒体快速、高效分离纯化技术体系,得到的线粒体完整,具有很强的荧光活性.利用SDS法提取、纯化的线粒体DNA(mtDNA)经紫外分光光度计分析,A260mm/A280nm值为1.80、A260nm/A230nm值为1.95;0.7%琼脂糖电泳检测获得的谱带清晰,长度在20 kb左右,无降解.本研究建立的方法与通常采用的密度梯度离心法相比,具有耗时短、对离心机的要求不高,且所提取的mtDNA产率高、结构完整等特点.以建立的技术体系提取7个柑橘品种的mtDNA进行RAPD分析,均扩增出清晰、多态性好的谱带,大小分布在250~2000bp之间.
柑橘、mtDNA、RAPD、差速离心
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S666(果树园艺)
国家科技支撑计划2006BAD01A1702,2007BAD61B04,2007BAD47B01,2008BAD92B05;农业部跨越计划项目资助
2009-12-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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