一种用于高效筛选极端酶突变基因的质粒营救法

摘要：

为简化定向进化筛选突变耐高温和耐酸碱酶等极端酶的繁复工作,建立了一种快速质粒营救法,可直接从加热处理的平板中回收携带有突变基因的质粒,用于进一步的随机突变基因的筛选和基因测序等.研究了在不同的热处理条件下的质粒营救效率,获得了质粒营救转化效率最高的处理条件.结果表明,本方法适于质粒大小在2～10 kb范围的载体,可用于平板筛选最适酶活性温度在60～100℃、pH 4～10的突变体酶,并可将一轮的筛选过程缩短1～2 d.

关键词：定向进化、筛选、质粒营救、极端酶

所属期刊栏目：28

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目30760009;河南省教育厅自然科学研究计划项目20081380010;湖北省教育厅重点课题D20081004

在线出版日期：2009-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：54-57