人肥胖基因大肠杆菌表达载体的构建及其诱导表达

摘要：

通过设计1对PCR引物(上游引物,5'-GCCATATGGTGCCGATCCAAAG-3',下游引物,5'-GA GAATTCCCTTCAAGGCCTCAG-3'),采用PCR方法扩增出人肥胖基因编码成熟肽的核苷酸序列,将扩增产物从琼脂糖凝胶上回收后插入测序载体pMD-18-T后进行了核苷酸序列测定.将经EcoRI和Nde I双酶切后的扩增产物插入经EcoR I和Nde I双酶切后的大肠杆菌表达载体pET-28a(+),构建了可在大肠杆菌中高效表达人瘦蛋白的表达载体.将表达载体转化人大肠杆菌菌株BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测,结果表明构建的人肥胖基因表达载体得到高效表达,重组蛋白占到菌体总蛋白的31.2%.

关键词：人肥胖基因、原核表达载体、诱导表达

所属期刊栏目：27

分类号：Q785;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家"863"项目2001AA213081;东南大学生物电子学国家重点实验室开放课胚资助

在线出版日期：2009-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：705-708