10.3321/j.issn:1000-2421.2008.05.008
黑曲霉内切β-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达
利用RT-PCR技术,提取黑曲霉(Aspergillus niger)L3的总RNA进行反转录,并通过PCR扩增得到去除天然信号肽的β-1,4-葡聚糖酶基因eg Ⅰ,将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,使之位于α-因子信号肽下游,并与之同框,构建重组表达质粒pPIC9k-eg Ⅰ,电击转化毕赤酵母GS115,经MM、MD、CMC-Na和G418平板筛选,得到重组毕赤酵母工程菌1#和5#,在摇瓶中β-1,4-葡聚糖酶酶活分别达到1456 U/mL和1928U/mL.重组酶最适温度为70℃,最适pH为5.0.
黑曲霉、β-1、4-内切葡聚糖酶、毕赤酵母、表达
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TS261.1+5(食品工业)
浙江省重大科技攻关项目2004C12010
2008-12-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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