烟草环斑病毒外壳蛋白基因片段原核表达载体的构建及表达

摘要：

根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量表达.重组蛋白经过Ni+-NTA纯化后,SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,TRSV-CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生的融合蛋白分子质量约为34ku,并具有免疫学活性.以纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,多抗血清效价达1:409600,可以与重组蛋白发生抗原抗体反应.

关键词：烟草环斑病毒(TRSV)、RT-PCR、原核表达、融合蛋白

所属期刊栏目：27

分类号：Q933;S432.4+1(微生物学)

资助基金：上海市科委项目06DZ05029,03DZ19314;教育部长江学者和创新团队发展计划项目200558;高等学校学科创新引智计划项目B07049

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：345-349