应用噬菌体随机十二肽库筛选猪传染性胸膜肺炎菌体抗原模拟表位

摘要：

利用猪传染性胸膜肺炎灭活菌苗免疫日本大耳兔得到猪传染性胸膜肺炎抗血清,将血清用饱和硫酸铵粗提IgG后,经DEAE-sephadex-A50低压层析系统纯化,以此得到IgG作为配基包被酶标板,对噬菌体随机十二肽库进行3轮不同条件的富集筛选,通过改变筛选条件,噬菌体的回收率从5.76×10-5增加到了1.69×10-2,P/N值逐步提高;随机挑取10个噬菌斑进行扩增,用ELISA检测其免疫活性,结果有6个阳性克隆与纯化的IgG有较强的特异性结合能力;对筛选到的6个阳性克隆提取ssDNA进行测序,并分析其氨基酸序列,其中5个克隆所递呈的序列一致,用Blastp软件进行分析,2种类型的氨基酸序列之间无同源性,且未发现同源性50%以上的序列,提示该短肽可能模拟了猪传染性胸膜肺炎菌体的特异的抗原表位.

关键词：噬菌体随机肽库、模拟表位、猪胸膜肺炎放线杆菌

所属期刊栏目：25

分类号：S858.28;Q785(动物医学（兽医学）)

资助基金：湖北省自然科学基金2004ABA133

在线出版日期：2006-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：347-350