春兰ISSR-PCR反应体系的优化

摘要：

以春兰为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、TaqDNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨,确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在15μL反应体系中含1×buffer,0.2mmol/L dNTPs,2.0 mmol/L MgCl2,0.2 μmol/L引物,0.3 UTaq DNA聚合酶,20ng模板DNA.PCR扩增程序:94℃预变性2.5 min;94℃变性45 s,48～58℃退火(退火温度随引物不同而定)45 s,72℃延伸2 min,35个循环;72℃延伸5 min.

关键词：ISSR、春兰、反应体系、遗传多样性

所属期刊栏目：25

分类号：S682.310.353(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：湖北省自然科学基金2004ABA119

在线出版日期：2006-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：305-309