烟曲霉植酸酶基因的克隆及在毕赤酵母的高效表达

摘要：

根据文献报道的烟曲霉植酸酶序列,设计引物以烟曲霉CCTCCAF93044的总DNA为模板进行梯度PCR,扩增出了1条约1.4 kb的带,将该片段进行DNA序列测定,其序列与已报道的烟曲霉植酸酶序列完全一致,但只编码完整的成熟植酸酶序列.将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达质粒pHBM108.该质粒转化毕赤酵母KM71所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,其中一重组子经144 h诱导,植酸酶表达量至少为1.25 mg/ml,比同类报道的表达量高出60%以上,以植酸钠为底物测得酶活为11.17 U/ml.

关键词：烟曲霉植酸酶基因、毕赤酵母、基因克隆、基因表达

所属期刊栏目：22

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省武汉市青年科技晨光计划20025001038;湖北省自然科学基金2003ABA118

在线出版日期：2004-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：529-532