伪狂犬病病毒gG基因缺失通用转移载体的构建

摘要：

对克隆有伪狂犬病病毒Ea 株基因组DNA SphI 15 kb片段的质粒pBSA用SphI和 KpnI消化 ,将含gG全基因及其上游PK基因、下游gD基因部分编码区约2.6 kb的片段亚克隆到消除了Eco RI位点的载体pUC19中,获得重组质粒pUSK(E).以pEGFP?N1为模板,通过PCR扩增约0. 3 kb的 SV40 Poly(A)片段,并将其克隆到杆状病毒转座载体pFastBac1的NotI和PstI 位点,利用p FastBac1的BamHI和PstI将含有9个酶切位点以及SV40 Poly(A)的片段亚克隆到pUSK(E)的相应位点,在插入的同时导致gG 基因5'端编码区约400 bp的缺失,构建了由gG启动子驱动gG部分编码区缺失的通用转移载体pgG-Uni.序列分析进一步证实:有7个单一酶切位点可供外源基因直接插入.上述结果为构建以伪狂犬病病毒作载体的多价基因工程疫苗以及利用标记蛋白探讨伪狂犬病病毒在体内的增殖与分布奠定了基础.

关键词：伪狂犬病病毒、gG基因、gG启动子、通用转移载体

所属期刊栏目：20

分类号：S852.65+9.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技攻关项目96-C01-04-03;国家自然科学基金3997 0559

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：306-309