三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)foxl2基因功能初探及相关miRNA分析
foxl2在脊椎动物卵巢分化、发育和功能维持等方面具有重要作用,然而其在三疣梭子蟹(Por-tunus trituberculatus)卵巢发育中的功能尚不明确.本研究首先克隆了三疣梭子蟹foxl2(Ptfoxl2)基因cDNA全长序列,该基因5′和3′非编码区域(UTR)长度分别为701?bp和211?bp,开放阅读框的长度为1590?bp.基因表达分析结果显示,foxl2在三疣梭子蟹不同组织中均有表达,但在卵巢中表达量最高;其在卵巢发育不同时期的表达存在显著差异,在V期表达量最高;切除眼柄后,该基因的表达出现显著下降;干扰该基因表达后,卵巢vtg基因的表达显著上调.上述结果表明,foxl2可能在三疣梭子蟹卵巢发育调控中发挥重要功能,能够抑制卵巢组织中卵黄蛋白的合成.为进一步分析该基因的表达调控方式,利用生物信息学方法,预测了靶向foxl2的miRNA,并通过双荧光素酶报告基因检测实验,从细胞水平验证了这些miRNA对Ptfoxl2的调控作用;分析了其在卵巢发育不同时期以及切除眼柄后的表达模式.结果显示,共转染miR-9类似物和包含foxl23′UTR的pmirGLO质粒组,萤火虫酶与海肾荧光素酶活性比值出现显著下降,且在卵巢发育过程及切除眼柄后与foxl2表达模式相反.该结果初步证实miR-9可以从转录后水平调控三疣梭子蟹foxl2基因的表达.
三疣梭子蟹、foxl2、切除眼柄、卵巢发育、miRNA
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S917.4(水产基础科学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;青岛市市南区科技计划;现代农业产业技术体系;中国水产科学研究院基本科研业务费;中国水产科学研究院基本科研业务费
2022-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
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