大珠母贝外套膜基因PMMG1的克隆、表达及其特征分析
EF-hand结构域在真核生物细胞内钙离子吸收和运输中发挥重要作用,在贝类中可能参与贝壳和珍珠质的形成.根据已报道的贝类中具有EF-hand结构域的碱基序列设计简并引物,从大珠母贝外套膜cDNA文库中筛选得到PMMG1基因(大珠母贝外套膜基因1).PMMG1基因全长618bp,开放读码框编码140个氨基酸,N-端的22个氨基酸肽段为信号肽.PMMG1氨基酸序列与合浦珠母贝PFMG1的一致性为56%,预测有两个EF-hand结构域.选取编码PMMG1成熟蛋白的cDNA序列插入pET-32a质粒构建表达载体,通过IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,成功获得预期大小的融合蛋白.凝胶电泳迁移率的变化证明PMMG1蛋白具有结合Ca2+/Mg2+的活性,组织特异性表达表明PMMG1基因在外套膜的表达量远高于其他组织.大珠母贝外套膜基因PMMG1的克隆与表达研究为进一步研究该蛋白在珍珠质矿化中的作用、探讨珍珠质形成的分子生物学机制奠定了一定基础.
大珠母贝、PMMG1、EF-hand结构域、融合蛋白、珍珠质
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Q959.21(动物学)
国家高技术研究发展计划"八六三"项目2006AA10A415;广东省科技推广项目A200701C02,A200899C04,A200900A07;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目2007TS07,2009YD02
2010-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
121-128
