哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建

摘要：

哈维氏弧菌是水产病害中常见的致病菌.参照基因库上登录的弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因序列设计简并引物,PCR扩增哈维氏弧菌TS-628株的FlaA全基因,并克隆到pMD 18-T载体中测序,经序列分析该基因全长1 140 bp,编码379个氨基酸.与基因库中其他弧菌的同源基因序列比较显示,哈氏弧菌FlaA基因与霍乱弧菌FlaA基因的同源性最高(79.5%),该基因编码的多肽缺乏半胱氨酸,并在N-,C-两端的氨基酸序列较为保守,中间区域的变异较大.对该蛋白的氨基酸组成及空间结构进行了分析和预测,并推测该蛋白质的平均分子量为40.6 kDa.在该基因末端加上一段编码Flag短肽的核苷酸序列后克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),获得带哈氏弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因的真核表达重组质粒pcDNA-FlaA-tag,为其DNA疫苗的进一步研究奠定了基础.

关键词：哈维氏弧菌、FlaA基因、基因克隆、序列分析、真核表达重组质粒

所属期刊栏目：29

分类号：S94;Q74(水产保护学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA603011;福建省科技攻关项目2002N009

在线出版日期：2008-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：74-79