半滑舌鳎白细胞介素12的p35a和p40c亚基在哈维氏弧菌感染下的表达和调控分析

摘要：

本研究以海水养殖鱼类半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,克隆了白细胞介素12(IL-12)的p35a亚基和p40c亚基的基因编码区序列,编码区长度分别为651bp和984 bp.系统进化树分析显示,半滑舌鳎的p35a和p40c分别与其他鱼类对应的基因聚为一支.氨基酸同源性分析显示,p35a 与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)相似性最高,p40c 与三棘刺鱼(Gasterosteus aculeatus)相似性最高,分别为52.04％和48.67％.组织表达分析显示,p35a在鳃、脑、心和卵巢中表达量较高,p40c在肝、脾、鳃和心中表达量较高.通过哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染实验,分析了半滑舌鳎p35a、p40c及其相关基因(ifn-γ和il-10)在哈维氏弧菌感染过程中的表达模式,p35a在脾中,48h表达显著上升(P＜0.05),之后表达逐渐下降;在肝和肠中,72 h表达显著上升.p40c在脾、肝中,6h表达显著上升;在肾中,48h产生上调;在肠中,6h开始上调,并在48h上升至最高点.ifn-γ在肝和肠中,均在p35a表达上调之前显著升高,在脾中晚于p35a上调表达;il-10在肝、脾、肾、肠中表达趋势中均与p40c的表达趋势相反.将半滑舌鳎淋巴细胞过表达p35a和p40c基因后,检测了受不同浓度脂多糖(LPS)刺激后干扰素(ifn-γ)、肿瘤坏死因子(tnf-α和tnf-β)等免疫相关细胞因子的表达变化.结果显示,p35a、p40c能够显著提高tnf-α在LPS刺激下的表达水平.上述结果表明,IL-12的p35a亚基和p40c亚基能够响应哈维氏弧菌对半滑舌鳎的刺激,过表达p35a、p40c能够通过诱导tnf-α基因的表达来参与机体的免疫应答.研究结果可为IL-12作为半滑舌鳎抗哈维氏弧菌疫苗佐剂的开发提供理论基础.

关键词：半滑舌鳎、免疫应答、白细胞介素12、哈维氏弧菌

所属期刊栏目：43

分类号：S941.42+4(水产保护学)

资助基金：国家重点研发计划;中国水产科学研究院创新团队项目;现代农业产业技术体系

在线出版日期：2022-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：12-23