鲤疱疹病毒2型微滴式数字PCR检测方法的建立及比较分析
本研究建立了定量检测鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析.结果表明,与qPCR相比,ddPCR具有相同的特异性,其灵敏性比qPCR低20倍.在定量CyHV-2 DNA时,ddPCR (R2=0.994)和qPCR (R2=0.994)均表现出良好的线性关系,且2种检测方法间的定量值呈正相关(R2=0.989).在定量检测相同稀释度的CyHV-2 DNA时,qPCR的定量值始终比ddPCR高10倍.ddPCR的组内和组间重复变异系数(CV)分别为0.59％-11.26％和6.55％-23.21％,而qPCR为16.57％-27.56％和22.31％-56.73％,说明ddPCR具有更好的稳定性.在临床样品定量检测时,ddPCR的检出率稍高于qPCR.本研究建立的ddPCR能够准确定量检测CyHV-2,将为CyHV-2相关研究提供有益参考.
微滴式数字PCR、鲤疱疹病毒2型、实时荧光定量PCR、定量检测
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S945(水产保护学)
国家质量监督检验检疫总局科技项目2013IK043;深圳市科技创新委国际合作项目GJHZ20150316155421411共同资助[This work was supported by General Administration of Quality Supervision,Inspection and Quarantine of the People's Republic of China2013IK043;Shenzhen Science and Technology Innovation Committee GJHZ20150316155421411]
2017-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
126-133
