半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Günther）IGF-Ⅱ的体外重组表达

摘要：

为在蛋白水平认识半滑舌鳎类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的生理功能，将 IGF-Ⅱ成熟肽序列克隆到原核表达载体 pET-28a 中，成功构建了重组半滑舌鳎 IGF-Ⅱ/pET28a 质粒，导入到 E. coli BL21(DE3)菌株后经 IPTG 诱导，获得了大小为11.4 kDa 的重组 IGF-Ⅱ蛋白，N 端含6个组氨酸，可特异性地被6×His 抗体识别。重组 IGF-Ⅱ蛋白在最优诱导条件37℃诱导2 h，目的蛋白表达量占重组表达菌总蛋白的43.7%，重组蛋白主要以包涵体存在。将获得的重组蛋白包涵体经变性、纯化和复性后，获得了纯化的 IGF-Ⅱ重组蛋白，其可在体外显著促进人乳腺癌 MDA231细胞的增殖，表明 IGF-Ⅱ重组蛋白具有体外细胞水平的生物活性。本研究结果可为认识鱼类 IGF-Ⅱ生理功能及半滑舌鳎生长调控机制提供理论支撑。

关键词：半滑舌鳎、IGF-Ⅱ、原核表达、生物活性

分类号：S961(水产养殖技术)

资助基金：鲆鲽类现代产业技术体系CARS-50;山东省自然科学基金项目ZR2012CQ025;中央级公益性事业单位基本科研业务费项目20603022012022;绍兴市院校科技合作项目2012704共同资助。

在线出版日期：2015-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：51-56