大菱鲆表皮蛋白质组双向电泳技术的建立及优化

摘要：

通过对表皮蛋白质提取方法、不同裂解液配方、等点聚焦程序和上样量等条件的对比试 验,建立及优化了大菱鲆表皮组织蛋白质的双向电泳体系.试验采用改良的TCA/丙酮和超声波提取相结合的方法提取大菱鲆表皮组织的全蛋白,裂解液配方根据Bio-Rad公司推荐的进行调整,使用17 cm pH 4～7的IPG胶条被动水化上样,上样量为250μg.等点聚焦程序采用30 V线性6 h、250V线性2.5 h、500 V线性1.5 h、1 000 V快速2 h、4 000 V线性3 h、8 000 V快速3 h、8 000 V线性1 h、500V 24 h,凝胶银染后用Image Master 2D Platinum 7.0软件进行分析,最终得到较满意的双向电泳图谱,具有较高的分辨率和重复性,为大菱鲆蛋白质组学的进一步研究奠定了基础.

关键词：大菱鲆、表皮组织、蛋白质、双向电泳

所属期刊栏目：32

分类号：Q953;S965.399(动物学)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项资金nycytx-50;国家支撑计划专题2006BAD01A12012;农业公益性行业科研专项经费项目nyhyzx07046;国家863计划课题2006AA100302

在线出版日期：2011-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：41-46