时间分辨荧光免疫分析高灵敏检测嗜水气单胞菌

摘要：

建立了生物素-链霉亲和素时间分辨荧光免疫分析(BAS-TRFIA)高灵敏检测嗜水气单胞菌的新方法.以兔抗IgG包被微孔板,加入嗜水气单胞菌菌株B18和生物素化IgG,生成的夹心复合物用Eu3+-链霉亲和素作为示踪物,Eu3+可与离解增强液形成时间分辨荧光(TRF),通过TRF值对病原菌定量.方法的检测限为1.0×102 cfu/mL,在1.0×10～1.0×106 cfu/mL范围内线性良好,相关系数0.9716.用该法检测时,不同来源的嗜水气单胞菌以及其它气单胞菌均呈阴性.板内和板间的变异系数分别小于5.00％和9.00％.所有相关检测试剂37℃恒温放置6d后,检测性能无明显改变.对60份人工感染的美洲鳗鲡组织样品,包括肝、肾、肠、鳃和肌肉等组织进行检测,阳性检测率为98.33％.结果表明,BAS-TRFIA法检测嗜水气单胞菌,灵敏度高、特异性好、操作简便,该方法为水产养殖病原菌检测提供了新的思路.

关键词：时间分辨荧光免疫分析、嗜水气单胞菌、生物素-亲和素系统、美洲鳗鲡、水产养殖

所属期刊栏目：75

分类号：TN2;P7

资助基金：项目受国家自然科学基金No.31272685资助.Project supported by the National Natural Science Foundation of China 31272685

在线出版日期：2017-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：398-402