双链特异性核酸酶介导的高灵敏度microRNA分析

摘要：

基于氧化石墨烯(GO)对荧光标记单链DNA探针的荧光猝灭效应以及双链特异性核酸酶(DSN)选择性切割DNA/RNA杂合结构中DNA单链的特性,本文建立了一种新型恒温信号放大方法用于microRNA (miRNA)的高灵敏度检测.靶标miRNA首先与荧光DNA探针杂交,DSN能够特异性地将杂合双链中的DNA探针水解为碎片但不会降解miRNA,GO对酶切产生的寡核苷酸碎片吸附能力显著降低,使得荧光基团远离GO表面而不被猝灭.释放出的miRNA可再次发生与荧光DNA探针杂交、DSN酶切等反应,如此反复,可实现恒温条件下一个miRNA分子与多个探针杂交、酶切、释放荧光基团的循环过程,最终体系的荧光信号得到显著放大,通过记录体系的荧光信号即可实现对靶标miRNA的灵敏检测.

关键词：microRNA、双链特异性核酸酶、氧化石墨烯、恒温信号扩增、荧光

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资助基金：项目受国家自然科学基金.21105020,20905018;河北大学引进人才项目No.2009177资助.Project supported by the National Natural Science Foundation of China.21105020,20905018;financial support of Hebei University2009177

在线出版日期：2014-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：395-400