基于荧光偏振的高灵敏度蛋白激酶活性分析
利用TiO2纳米棒与磷酸化肽的特异性相互作用,基于荧光偏振检测,建立了快速、简便的高灵敏度蛋白激酶活性分析方法.在蛋白激酶催化作用下,荧光标记的肽底物被磷酸化,磷酸化的荧光肽通过磷酸基团特异性结合在TiO2纳米棒表面,从而使底物肽上标记的荧光分子的旋转速率发生改变,通过对荧光偏振度进行测量,可实现蛋白激酶活性的定量检测,该方法对蛋白激酶A (PKA)的检出限可达0.0004 U·μL-1.此外,该方法还成功用于PKA抑制剂H-89的检测,在基于蛋白激酶抑制剂的靶向药物筛选方面具有很好的应用前景.
荧光偏振、蛋白激酶A、磷酸化、TiO2纳米棒、抑制剂筛选
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the National Natural Science Foundation of China91127035;Doctoral Fund of Ministry of Education of China No.20111301130001.项目受国家自然科学基金91127035;教育部博士点基金20111301130001
2014-01-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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