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电场方式对毛细管电泳分离DNA的影响

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以羟乙基纤维素为筛分介质,在直流、方波脉冲、反向脉冲电场中对0.1~10.0kbp范围的DNA样品进行分离,改变脉冲电场调制深度,探讨电场方式对毛细管电泳分离DNA的影响.研究发现,其它实验条件一定时:(1)直流电场下,小片段DNA(〈1.0kbp)可以被有效分离,大片段DNA(〉1.0kbp)迁移时几乎重叠在一起;(2)方波脉冲电场下,增大调制深度可提高大片段DNA(〉1.0kbp)分离效果,但降低了部分小片段DNA(0.6~1.0kbp)的分离度;(3)反向脉冲电场下,可以实现0.1~8.0kbp范围内各个DNA片段的有效分离,改变调制深度会影响样本DNA的分离时间.并将反向脉冲电场应用于毛细管电泳分离λ-DNA的EcoTl4I/BglII限制性内切酶酶切片段.结果表明,反向脉冲毛细管电泳技术具有快速、准确、重复性高等特点,可用于宽分子量范围DNA片段分离.

毛细管电泳、DNA、羟乙基纤维素、脉冲电场、直流电场

70

O657.8(分析化学)

项目受国家自然科学基金N0.21205078;上海市教委科研创新项目13YZ073;上海市科技发展基金10540500700;上海理工大学教师创新能力建设GDCX-Y-1205;部分受卜海市重点学科项目第三期S30502

2012-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

2073-2078

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化学学报

0567-7351

31-1320/O6

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2012,70(19)

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