口腔癌细胞Cal27外泌体对人正常牙龈成纤维细胞的生物学作用

摘要：

目的 通过将Cal27外泌体(Cal27-exo)与正常人牙龈成纤维细胞(NHGFs)共培养,测定共培养后NHGFs+Cal27-exo的增殖迁移能力及相关蛋白表达情况,探讨Cal27-exo对NHGFs的活化及生物学行为的影响.方法 采用超速离心法提取Cal27-exo,并用蛋白免疫印迹(Western blot)、透射电子显微镜以及粒径分析对外泌体进行鉴定.将Cal27-exo与NHGFs共培养,检测NHGFs对Cal27-exo的摄取情况,用划痕实验和CCK8检测NHGFs+Cal27-exo的迁移和增殖能力,用实时荧光定量聚合酶链反应检测NHGFs活化相关蛋白金属基质蛋白酶9(MMP-9)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)和转化生长因子β(TGF-β)的mRNA表达.结果 超速离心法提取的Cal27-exo中Alix和CD63表达阳性;透射电子显微镜示Cal27-exo呈类圆形双层膜性囊泡;粒径检测示Cal27-exo直径为30～150 nm.共培养后Cal27-exo进入NHGFs内,划痕实验结果示NH-GFs+Cal27-exo的迁移能力强于NHGFs,CCK8结果示NHGFs+Cal27-exo的增殖活力强于NHGFs.实时荧光定量聚合酶链反应结果显示,与NHGFs相比,NHGFs+Cal27-exo的MMP-9表达上调,TGF-β、αSMAmRNA表达下调(P<0.05).结论 NHGFs+Cal27-exo的增殖活性和迁移能力明显增强,相关蛋白的mRNA水平改变.Cal27-exo能活化NHGFs,对肿瘤的侵袭转移有潜在意义.

关键词：口腔癌、外泌体、细胞增殖、细胞迁移、成纤维细胞

所属期刊栏目：39

分类号：R739.8(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;兰州大学口腔医学科研扶持基金

在线出版日期：2021-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：313-319