降钙素基因相关肽通过Hippo通路调控小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究
目的：前期研究发现降钙素基因相关肽（CGRP）能够促进成骨细胞的生物学活性，为了进一步揭示CGRP在骨修复中的作用，检测CGRP对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化的影响，并对Hippo通路在这个过程中的作用进行了初步探讨。方法在体外诱导培养的BMSCs中加入不同浓度的CGRP，处理48?h后测试碱性磷酸酶（ALP）活性，以筛选的优势浓度；处理7?d后进行茜素红染色，分别检测细胞的分化情况。应用Western?blot检测CGRP作用于BMSCs后，Hippo通路核心分子Mst1/2蛋白磷酸化的表达水平；利用Hippo通路抑制剂维替泊芬（Verteporfin）阻断下游Yap信号，逆转录聚合酶链反应检测其对成骨相关因子Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）、Runt相关转录因子2（Runx2） mRNA的表达影响。结果 ALP活性检测结果显示，与空白对照组相比，10-9、10-8、10-7?mol·L-1浓度范围的CGRP都能显著促进小鼠ALP活性的增加（P<0.05），以10-8?mol·L-1浓度的CGRP为最佳刺激浓度。用10-8?mol·L-1浓度的CGRP处理后，茜素红染色显示钙化结节明显增多。CGRP能够显著上调p-Mst1/2蛋白的表达（P<0.05）；当运用了抑制剂Verteporfin时，显著降低了CGRP诱导的Runx2、ColⅠ?mRNA的表达（P<0.05）。结论 CGRP能够促进小鼠BMSCs的成骨分化，且Hippo信号通路介导了CGRP作用于小鼠BMSCs成骨分化的过程。
降钙素基因相关肽、骨髓间充质干细胞、Hippo信号通路
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Q 254
国家自然科学基金81371110，81300873Supported by:The National Natural Science Foundation of China81371110,81300873
2016-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
286-290
