人骨形态发生蛋白2真核表达载体构建及其基因/

摘要：

目的：构建人骨形态发生蛋白（BMP）2的真核表达型载体，并利用其与壳聚糖制备纳米复合体。方法体外利用双酶切法将pMD18T-hBMP2-His质粒与pIRES2-EGFP真核表达载体连接，构建pIRES2-EGFP-hBMP2-His真核表达载体；采用5种不同相对分子质量及脱乙酰度的壳聚糖，通过去溶剂法在不同N/P比（壳聚糖中的胺基含量与质粒中磷酸基含量的摩尔比）情况下制备壳聚糖/pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体。ZetaPALS电位及粒度分析仪检测纳米复合体的粒径大小、分布及Zeta电位，琼脂糖凝胶电泳分析及荧光分光法评定壳聚糖对pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体的包裹情况，原子力显微镜观察粒径形貌。结果1）成功构建pIRES2-EGFP-hBMP2-His真核表达载体，并经酶切、测序证实；2）成功制备壳聚糖/pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体，壳聚糖对pIRES2-EGFP-hBMP2-His质粒具有包裹作用；3）制备的壳聚糖/pIRES2-EGFP-hBMP2-His复合体呈球状，粒径为111.7~3214.2nm，Zeta电位为4.93~16.79mV。结论壳聚糖可与pIRES2-EGFP-hBMP2-His复合形成纳米微粒。

关键词：人骨形态发生蛋白2、真核表达载体、壳聚糖、纳米复合体

分类号：R783.4(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81170997

在线出版日期：2014-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：493-497