10.3969/j.issn.1000-1182.2012.05.005
血管内皮生长因子和转化生长因子β1基因调控人根尖乳头细胞矿化相关因子的研究
目的 克隆人血管内皮生长因子(VEGF)异构体中的VEGF165,构建真核表达载体,探讨过表达VEGF165和转化生长因子β1 (TGFβ1)对人根尖乳头细胞矿化相关因子的影响.方法 提取人脐静脉内皮细胞系ECV304总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增VEGF165基因,插入pcDNA3.1 hisA,构建重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165,经酶切及测序验证正确后,将其和pcDNA3.1hisA-TGF31转染人根尖乳头细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测转染效率和骨涎蛋白(BSP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的表达.结果 插入表达载体的VEGF165基因序列与GenBank数据库中的序列具有100%同源性;转染后VEGF165及TGFβ1 mRNA显著增高;各实验组DSPP mRNA的表达均升高(P<0.05),实验2组和实验3组的OCN mRNA升高(P<0.05),各组间BSP mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05),DMP1 mRNA均未见表达.结论 成功构建VEGF165真核表达载体,VEGF165和TGFβ1均能促进人根尖乳头细胞多种矿化因子的表达,与根尖乳头细胞的分化相关.
血管内皮生长因子、基因克隆、转化生长因子β1、转染、根尖乳头细胞、矿化作用
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Q786(基因工程(遗传工程))
山东省科技发展计划基金资助项目2010G0020230;山东大学自主创新基金自然科学类专项交叉学科培育基金资助项目20-11JC019
2012-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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