牙龈卟啉单胞菌PG0839基因突变株的构建

摘要：

目的 构建牙龈卟啉单胞菌毒力岛基因PG0839突变菌株,为研究PG0839基因功能提供实验基础.方法 扩增1 584 bp PG0839基因片段,对聚合酶链反应(PCR)产物和pUC19载体进行BamHⅠ和EcoR Ⅰ双酶切,连接酶切产物得到质粒pPG0839-1.将2 101 bp erm基因产物插入到pPG0839-1中PG0839基因的EcoRV位点,构建质粒pPG0839-2,作为电穿孔的供体质粒.电穿孔转化于受体菌牙龈卟啉单胞菌W83菌株,红霉素抗性培养基筛选阳性克隆,命名为PG0839基因突变菌株.结果 运用插入失活方法构建PG0839基因突变菌株,进而通过酶切、测序、PCR和反转录PCR对PG0839基因突变菌株进行验证,证实PG0839基因突变菌株构建成功.结论 本实验成功构建PG0839基因突变菌株.

关键词：牙龈卟啉单胞菌、毒力岛、基因打靶

所属期刊栏目：30

分类号：R781.5(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81070834

在线出版日期：2012-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：192-196,200