变形链球菌luxS基因同源重组克隆载体的构建实验

摘要：

目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究.方法利用高保真的pfu DNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH 1+质粒的卡那霉素抗性基因片段(Kana),依次采用相应的双酶切反应将这些片段连接入噬菌体载体pBluescriptRSK(+)Phagemids,以构建目的质粒Xukd-pbsk重组载体.结果经酶切鉴定目的质粒各片段插入无误,插入片段的测序报告也显示碱基无错配,含目的质粒的菌株可在含30 mg/L卡那霉素的LB培养基内生长良好,证明插入的卡那霉素抗性基因体外表达良好.结论本研究构建的变形链球菌luxS基因同源重组克隆载体正确,可用于今后对于变形链球菌luxS基因突变株构建的研究.

关键词：变形链球菌、luxS基因、同源重组克隆载体

所属期刊栏目：24

分类号：R781.1(口腔科学)

资助基金：中国科学院资助项目30400497;上海市科委资助项目04JC14066

在线出版日期：2006-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：70-72