变形链球菌表面蛋白pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP真核表达质粒的构建

摘要：

目的:构建变形链球菌表面蛋白真核表达质粒pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP，即表面蛋白氨基端与中央区T、B细胞表位的两个基因疫苗。方法:通过PCR扩增，获得分别编码变形链球菌表面蛋白PAc氨基端和中央区T、B细胞表位的两个目的基因pac-A和pac-P。将它们与真核穿梭表达载体pcDNA3进行体外重组，并转化大肠杆菌 XL1-Blue，采用菌落原位杂交筛选出阳性克隆子后，抽提重组质粒，进行酶切鉴定、Southern杂交分析和DNA序列测定。结果:真核表达质粒pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP构建正确，目的基因pac-A和pac-P定向插入至真核表达载体中，插入的相位正确，未改变目的基因的阅读框架。结论:真核表达质粒pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP分别包含了变形链球菌表面蛋白PAc氨基端和中央区免疫显性T、B细胞表位的编码基因，为基因疫苗进一步研究奠定基础。

关键词：变形链球菌、表面蛋白抗原、T、B细胞表位、真核表达质粒、基因疫苗

所属期刊栏目：18

分类号：R4(临床医学)

资助基金：国家自然科学基金39770797

在线出版日期：2007-08-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：408-411