聚合酶链反应仪样本浓度示值误差校准方法

摘要：

依据JJF 1527-2015《聚合酶链反应分析校准规范》探讨聚合酶链反应(PCR)仪样本浓度示值误差的校准方法.在PCR仪样本浓度示值误差校准过程中,标准曲线的拟合有两种方法:采用配制标准物质所在反应孔的全部原始数据进行拟合;先取同一浓度的标准物质所在反应孔的数据平均值,再根据这些平均值进行拟合.根据拟合的标准曲线以及样本所在反应孔扩增循环阈值Ct求得若干个浓度对数值后,样本浓度测量平均值的计算方法有两种:取浓度对数值的均值,根据均值求得对应的浓度值作为样本浓度的测量平均值;求得每一个浓度对数值对应的浓度测量值,取浓度测量值的均值作为目标样本浓度的测量平均值.在标准曲线的拟合和样本浓度测量平均值的计算过程中,不同方法的组合导致样本浓度示值误差的计算以及不确定度评定方法有4种.分别用这4种方法对20组PCR仪扩增获取的数据进行计算,采用F检验对计算结果进行差异显著性分析.结果显示,4种方法的计算结果差异性不显著.在PCR仪校准工作中,综合考虑数据准确性以及计算简洁性,推荐采用原始数据进行标准曲线拟合、将依据浓度对数值的均值求得的浓度值作为样本浓度的测量平均值这种方法进行PCR仪样本示值误差校准.

关键词：PCR仪、示值误差、校准、不确定度

所属期刊栏目：32

分类号：O657.3(分析化学)

在线出版日期：2023-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：94-99