土壤原核微生物RNA加Poly(A)尾的方法研究

摘要：

采取共提取法提取土壤微生物总RNA后,经过去DNA、过柱纯化等手段,利用Poly (A)聚合酶在纯化RNA末端添加Poly(A)尾,将产物逆转录成cDNA第一链,用细菌16S rDNA引物和nosZ(氧化亚氮还原酶基因)引物扩增目的片段.结果表明:利用此方法能够获得带有Poly(A)尾的土壤原核微生物核糖体RNA和mRNA,产物经过一次转录后,可用于扩增土壤微生物目的基因.此方法相对于利用目的基因特异下游引物来作为逆转录引物获得cDNA更加方便,用于研究土壤原核微生物多个基因的表达特征时,此方法十分实用.

关键词：土壤、微生物、RNA、加Poly(A)尾、逆转录

分类号：Q752(分子遗传学)

资助基金：国家科技支撑项目2012BAD14B03;国家自然科学基金资助项目41090282;“973”计划项目2012CB417100

在线出版日期：2016-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-4,8