基于酿酒酵母的多片段质粒的构建

摘要：

为避免现有的多片段质粒构建技术的弊端,提高多片段质粒构建效率,以构建树干毕赤酵母Agglutinin-like基因的敲除载体为例,利用酿酒酵母活体细胞重组系统,一次性将多个外源 DNA片段和线性化质粒重组,形成环状质粒.通过引物设计在相互连接的DNA片段之间引入 50 bp重叠序列,用PCR扩增DNA片段后,与线性化质粒一起转化酿酒酵母,再用 PCR 和测序等方法鉴定阳性酵母菌落中质粒的正确性.通过本方法构建的多片段质粒正确率高、耗时短.

关键词：质粒构建、多片段质粒、酵母同源重组系统

所属期刊栏目：49

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国农业科学院科技创新工程;湖南省自然科学基金项目;湖南省植保植检站植物防疫防控科研项目

在线出版日期：2023-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：421-427