化脓隐秘杆菌间接免疫荧光方法的建立及应用

摘要：

通过制备兔抗化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)高免血清,筛选固定方法、封闭液、洗涤液、抗体稀释度、抗体孵育时间等应用条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌的间接免疫荧光方法.结果表明:用冷丙酮作固定剂,10％山羊血清作封闭液,0.05％Tween-20的0.01 mol/L pH 7.4 PBS(磷酸缓冲盐溶液)作洗涤液,兔抗化脓隐秘杆菌高免血清(一抗)1:50稀释,37℃作用2 h,羊抗兔FITC(二抗)1:100稀释,37℃作用2 h,草酸铵结晶紫衬染菌体3 min,对纯培养物化脓隐秘杆菌检测,可见清晰的特异性荧光,能区分溶血隐秘杆菌、伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、猪链球菌;在人工感染化脓隐秘杆菌死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及发病山羊临床病料中均能检出化脓隐秘杆菌.

关键词：山羊、小鼠、化脓隐秘杆菌、高免血清、间接免疫荧光方法、特异性、灵敏度

所属期刊栏目：46

分类号：S852.61+2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目;"十二五"国家科技支撑计划项目;重庆市留学人员回国创业创新支持计划项目

在线出版日期：2020-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：230-235