黄花蒿悬浮培养细胞系的建立及遗传转化

摘要：

为建立稳定的黄花蒿悬浮细胞系,以黄花蒿428–A植株的子叶、茎、腋芽和叶片为外植体,以MS为基础培养基,采用3因素(6–BA、NAA、2,4–D)4水平的L16(43)正交试验,优化黄花蒿愈伤组织诱导培养基,分析不同质量浓度(0、5、10、15、20、25、30 mg/L)潮霉素对黄花蒿悬浮细胞生长的影响,比较羧苄青霉素(0、100、150、200、250、300 mg/L)对农杆菌的抑制效果,并运用农杆菌介导法对黄花蒿悬浮细胞进行GUS报告基因及色氨酸单加氧酶iaaM基因的遗传转化.结果表明:黄花蒿叶片愈伤诱导率较高,叶片愈伤组织较优培养基为MS+6–BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,出愈率可达99.33％;潮霉素最适筛选质量浓度为30 mg/L,羧苄青霉素最适抑菌质量浓度为200 mg/L;转基因抗性愈伤GUS组织化学染色及PCR鉴定结果表明,外源基因iaaM已导入并整合至黄花蒿基因组中.

关键词：黄花蒿、6—苄基氨基腺嘌呤、萘乙酸、二氯苯氧乙酸、悬浮细胞、农杆菌介导、遗传转化

所属期刊栏目：44

分类号：Q949.783.5;Q943(植物学)

资助基金：湖南省大学生科技创新项目DFCXS201206

在线出版日期：2019-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：607-612