抗红斑丹毒丝菌的rSpaA蛋白猪源单链抗体库构建及单链抗体淘选

摘要：

从免疫过rSpaA的猪的脾淋巴细胞中提取总RNA，采用RT–PCR技术反转录合成cDNA。设计兼并引物扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段，采用重叠延伸PCR方法，将VH和VL通过Linker连接成重组单链抗体(以下简写为 scFv)的基因片段。将 scFv 的基因连接至噬菌粒载体 pComb3Xss，将重组载体电转化至宿主菌XL1-Blue，并经辅助噬菌体M13KO7拯救，获得猪源噬菌体单链抗体库，库容约为2.5×106。以rSpaA为靶抗原，经免疫亲和筛选，获得8株特异性较好的阳性克隆。本研究结果可为制备抗红斑丹毒丝菌的重组scFv提供新途径，并为猪丹毒的免疫检测和综合防制提供材料基础。

关键词：猪源抗体库、单链抗体、红斑丹毒丝菌、噬菌体展示技术

所属期刊栏目：42

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31272652；现代农业产业技术体系建设专项CARS-46-42

在线出版日期：2016-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：647-653