建鲤IL-1β和IL-8基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要：

根据GenBank上的基因序列,在保守区设定并合成特异性引物,选择β-actin作为内参基因,采用SYBRGreen Ⅰ染料法,进行熔解曲线分析和标准曲线的制作.熔解曲线表明,β-actin、IL-1β、IL-8的基因产物均为特异性产物,其Tm值分别为86、82.5和84℃;标准曲线表明,各基因Ct值的检测范围为12 ～ 32,扩增效率分别为96.3％,103.2％和102.6％,具有良好的线性关系,且r2均大于0.990;组内变异系数分别为0.14％～0.86％,0.18％ ～0.93％和0.13％ ～ 0.86％;用建立的方法检测健康建鲤头、肾组织中IL-1β、IL-8的表达情况,相对表达量分别为1.09和1.71.综合分析,建立的建鲤IL-1β、IL-8基因实时荧光定量PCR方法具有检测范围广,扩增效率高,特异性强,重复性高的特点,可用于建鲤IL-1β、IL-8基因的表达测定.

关键词：建鲤、IL-1β、IL-8、实时荧光定量RT-PCR

所属期刊栏目：40

分类号：S941(水产保护学)

资助基金：四川省科技厅国际科技合作项目;学术带头人培养基金

在线出版日期：2015-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：627-632