5”UTR序列对DR5::GUS基因瞬时表达的影响

摘要：

利用生长素响应原件(DR5)构建了DR5::GUS报告基因表达载体,并在载体构建时,对GUS的5”UTR序列进行2种设计:一种是利用载体GUS基因原有的5”UTR构建成pBI121-DR5::GUS;另一种采用植物增强表达的常用原件烟草花叶病毒(TMV)的5”端序列(Ω”)替换GUS基因原有的5”UTR序列,构建成pBI121-DR5(Ω”)::GUS.将2种载体转化根癌农杆菌后,采用烟草叶片注射浸染的瞬时表达检测法对2个载体的植物表达效果进行检测,2种载体分别转化烟草叶片2d后,对浸染的叶盘进行GUS染色分析,pBI121-DR5::GUS的转化叶片有明显的GUS反应,而pBI121-DR5(Ω”)::GUS的转化叶片则无GUS反应.分离注射浸染部位叶盘RNA后,对GUS特异引物进行RT-PCR分析,2种转化的基因都已有效转录出RNA,但前者能翻译出相应的β-葡萄糖苷酸酶,后者则不能完成翻译过程,说明Ω”序列的引入并未有效提高GUS基因的表达,反而抑制了mRNA的翻译.

关键词：5’非编码区、生长素基因报告系统、瞬时表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖南省教育厅项目SXC1103

在线出版日期：2012-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：146-149