琥珀酰辅酶A转移酶硝基化酪氨酸位点特异单克隆抗体的制备

摘要：

线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基,其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr76)的硝基化可导致其酶活性下降,制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测.应用淋巴细胞杂交瘤技术,以化学合成的含琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr76肽段为半抗原,偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后,作为免疫原免疫Balb/c小鼠,分离免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了多株融合细胞.经对融合细胞多次筛选和检测,最终获得4株单克隆抗体,分别对应SCOT Tyr4和Tyr76硝基化后表位,其间接ELISA检测效价分别达到1∶128 000、1∶32000、1∶512000和1∶4096000,表明抗体具有较强特异性和灵敏度.

关键词：线粒体琥珀酰辅酶A转移酶、硝基化酪氨酸、单克隆抗体

所属期刊栏目：37

分类号：R392.11

资助基金：湖南省研究上科研创新项日CX2009B140

在线出版日期：2011-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：436-439