茶氨酸生物合成基因工程菌的构建及重组酶的表达

摘要：

将来源于Escherichia coli DH5α的γ-谷氨酰转肽酶基因克隆到高表达质粒pET-32α中,并转化E.coli BL21,构建茶氨酸生物合成的基因工程菌.工程菌在温度为20℃,OD600nm为1.5,IPTG浓度为0.1 mmol/L,培养基初始pH为7的条件下,诱导培养6 h,γ-谷氨酰转肽酶的酶活力达(4.41±0.17)U/mL,大约是出发菌株Ecoli DH5α的18.4倍.直接以工程菌为催化剂,在200 mmol/L谷氨酰胺、1.5 mol/L乙胺盐酸盐、pH 10、20℃的条件下,反应6 h,茶氨酸合成量达12.6 mg/mL,L-谷氨酰胺转化率为41.05%.

关键词：茶氨酸、工程菌、γ-谷氨酰转肽酶、重组质粒、重组酶

所属期刊栏目：37

分类号：S571.1

资助基金：国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划（973计划）;湖南农业大学人才科学基金项目

在线出版日期：2011-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：267-270