双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌

摘要：

根据无乳链球菌的cfb基因和海豚链球菌16S rRNA基因序列,设计、合成2对引物,优化扩增条件,建立了快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌的双重PCR方法.用该方法扩增无乳链球菌和海豚链球菌,可分别获得474、296 bp的特异性片段,扩增嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌等其他常见鱼病原菌无特异性片段.该方法可实现对无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,具较高的灵敏度,可检测到基因组含量分别为3.2×10-3 ng/μL的无乳链球菌和3.0×10-2 ng/μL的海豚链球菌.对采集自广东与海南两省养殖罗非鱼病鱼的11份病原样品进行检测,均可获得474 bp片段,测序与BLAST分析结果表明,扩增到的序列均为无乳链球菌cfb基因序列,可从分子水平上确定这些样品为无乳链球菌,与生化鉴定结果一致.

关键词：双重PCR、无乳链球菌、海豚链球菌、cfb基因、16S rRNA

所属期刊栏目：36

分类号：S941.4(水产保护学)

资助基金：国家科技支撑计划;现代农业产业技术体系建设专项;广东省农业重点项目;公益性行业农业科研专项;农业部"引进国际先进农业科学技术"项目

在线出版日期：2010-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：449-452