茶树ISSR-PCR反应体系的正交优化

摘要：

对茶树ISSR-PCR反应体系中的5因素(Taq酶浓度(U/(20 μL))、Mg2+浓度( mmol/L)、模板DNA质量浓度( ng/(20 μL))、dNTP浓度( mmol/L)、引物浓度(μmol/L))在4水平上进行正交优化试验,筛选出各因素的最佳水平,建立茶树最佳ISSR-PCR反应体系,即20 μL反应体系中,Taq DNA聚合酶为1.0 U/(20 μL),Mg2+为2.0 mmol/L,模板为40 ng/(20 μL),dNTP为0.20 mmol/L,引物为0.25 μmol/L.对茶树ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,确定引物ISSR1、UBC881的最适退火温度分别为52.4、59.0 ℃.

关键词：茶树、ISSR-PCR、反应体系、正交设计

所属期刊栏目：36

分类号：S603.2(一般性问题)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2010-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：414-417