玉米MON863质粒DNA标准物质的研制

摘要：

转基因成分检测是转基因生物安全应用和管理的重要技术支撑,转基因标准物质种类的不足可影响转基因生物检测方法的建立和标准化.选取玉米MON863中外源基因MON863与内标基因Adh1构建质粒标准物质,通过测序验证,以双重数字PCR技术对获得的质粒DNA进行均匀性及不同温度下(-20、4、25、37℃)短期(14 d)和-20℃长期(6个月)稳定性检验,联合8家实验室进行定值分析.结果显示,玉米MON863质粒DNA标准物质具备良好的均匀性,可以在-20℃稳定存放6个月;外源与内标基因的拷贝数比值为1.01,扩展不确定度为0.04;拷贝数为5.78×1010 copies/μL,扩展不确定度为0.29×1010 copies/μL.获得的标准物质适用于玉米MON863的方法学建立、定性定量检测和实验室质控等应用.

关键词：质粒DNA;标准物质;数字PCR;双重数字PCR;转基因玉米

所属期刊栏目：43

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家重点研发计划2018YFC1603400

在线出版日期：2021-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1729-1734