10.13822/j.cnki.hxsj.2020007642
亲水作用色谱用于西妥昔单抗的N端糖链分析
单克隆抗体的糖链对其功能活性具有重要的影响,因此开展糖链分析技术的研究具有十分重要的意义.采用亲水作用色谱荧光检测方法建立了N端糖链的定量分析技术.对于常见的3种N端糖链G0F、G1F、G2F,其线性范围分别为7.5×10-11~ 1.5×10-s、4.5× 1011 ~9.0×10-9以及7.5×10-11~4.5×10-9 mol/L;检测下限分别为2.8× 10-11、2.5× 10-11、2.6×10-11 mol/L;保留时间和峰面积的RSD值均小于3%,方法的回收率均大于95%.采用酶切N端糖链和2-氨基苯甲酰胺标记法可以实现西妥昔单抗的这3种N端糖链的含量分析,分别为86.0、85.1、16.6 μg/g.除了上述3种糖链,还利用超高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术进一步对西妥昔单抗其他6种相对丰度较高的N端糖链的种类进行解析.这些研究不仅可以应用于单抗药物的N端糖链的质控分析,而且对其糖链种类进行解析以实现更多的生物学研究.
亲水作用色谱(HILIC)、2-氨基苯甲酰胺、N端糖链、西妥昔单抗、液质联用技术
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O657.7(分析化学)
上海市科委科研计划项目18142202600
2020-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1169-1175